离解常数

离解常数是一个动力学参数,用于测定两个或多个分子之间的分子间相互作用和结合事件。其中,结合速率 (ka) 描述一个分子与另一个分子结合形成复合物的速率。解离速率 (kd) 描述这种复合物衰减的速率,其单位为 s-1。这两个参数一起用于确定平衡解离常数或结合亲和力 (KD)。

如何测定离解常数?

下面的图表显示测量结合相互作用的结果。首先,使用固定配体令缓冲液流过传感器,以此确定基线。之后,令缓冲液流过样品(分析物)。在结合阶段,分析物与分析物相互结合,计算出结合常数。将缓冲液从样品流回缓冲液,开始解离阶段。

结合相互作用测定结果曲线(传感图)。

测定离解常数有多重要?

两种相互作用具有相同的亲和力 (KD),大不相同的动力学参数(ka 和 kd)。  

在下面的示例中,蓝线表示的相互作用可快速结合和解离,红线表示的相互作用明显结合和解离均较慢。

这会导致 kd/ka 比率相同,进而亲和力 (KD) 相同。

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具有相同的亲和力 (KD),大不相同的动力学参数(ka 和 kd)的两种相互作用的示例

这意味着仅测量亲和力参数通常不足以确定哪些化合物可能值得进一步开发为药物。  研究人员可能正在寻找药物和靶标达到饱和时,两者之间的快速相互作用,例如蓝线代表的相互作用。

为什么离解常数与药物开发相关?

在药理学方面,特别是药物发现方面,解离速率是确定药物潜力的一个重要参数:药物在复合物中(如药物在药物靶点中)的有效时间会影响其对靶点的效果,也就是我们通常所说的药物有效性。  因此,在早期药物发现中,潜在药物通常会经过筛选,并根据其解离率进行排序。解离速率 (kd) 或解离率 (koff) 可以通过生物传感器测定。

WAVEsystem 是一个光学生物传感器,可在测量结合动力学时测定离解常数。它具有高灵敏度,兼容天然样品;同时 waveRAPID® 方法还可提高通量,因此 WAVEdelta 非常适合于解离率筛选

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